1 ПОДХОДЫ К ДИАГНОСТИКЕ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ | Медицина Российской Федерации

ПОДХОДЫ К ДИАГНОСТИКЕ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ


Распространенность герпесвирусной инфекции (ГВИ) в настоящее время возможно достигла предельного для популяции людей уровня. Инфицированность населения ВПГ составляет более 90%.

image001.jpg

Антонина Павловна ПОРЫВАЕВА

Ведущий научный сотрудник ФГУН «Екатеринбургский НИИ вирусных инфекций» Роспотребнадзора, к.б.н.

Главными причинами широкого распространения болезней, вызванных ВПГ, исследователи считают уникальную способность вируса переходить в латентное состояние, интегрироваться с геном хозяина, принимая качественно новую форму. Клинические проявления инфекции многообразны – от латентных до генерализованных форм с поражением нервной системы и внутренних органов. В зависимости от пола, возраста и давности заболевания может изменяться как острота процесса, так проявление и форма заболевания.

Диагностика инфекции, основанная на клиническом течении, крайне затруднена вследствие многообразия проявления заболевания. В клинических лабораториях для диагностики ГВИ применяются иммуноферментный анализ (ИФА), который выявляет специфические антитела к ВПГ, а также полимеразная цепная реакция (ПЦР) – для детекции ДНК вируса.

ИФА выявляет специфические антитела к ВПГ классов IgM и IgG. Антитела класса М появляются в течение первых двух недель после заболевания (титр 1:100 и выше), что свидетельствует о первичном инфицировании или реактивации латентной инфекции. Однако у 15-18% больных низкие титры (1:100 – 1:200) могут сохраняться до 12 месяцев. Антитела класса G появляются через 14-21 день после заражения и у переболевших пациентов сохраняются до 10 лет. Об активном развитии инфекционного процесса достоверно свидетельствует только 4-х кратное увеличение титра антител IgG при исследовании парных сывороток, с интервалом забора в 2-3 недели. Вследствие ряда объективных причин не всегда можно исследовать повторные сыворотки. Также при хронической ГВИ нарастание титра не всегда выявляется, хотя уровень антител остается неизменно высоким (1:400-1:800), либо составляет 2-х кратное увеличение, что делает невозможным выявление периода рецидива заболевания.

Применяемый в настоящее время в клинико-лабораторной практике высокоспецифный и чувствительный молекулярно-биологический метод (ПЦР) позволяет определить наличие вирусной ДНК в организме пациента при любой форме инфекции, что особенно важно при персистирующей и латентной инфекции, особенно у пациентов с выраженными нарушениями иммунной системы и у пациентов с микст-инфекциями. Однако, являясь высокочувствительным методом, ПЦР не позволяет дифференцировать периоды заболевания и оценить эффективность проводимого антивирусного лечения.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ), относящаяся к серологическим методам диагностики, позволяет определить локализацию антигена ВПГ непосредственно в клиническом материале от больного, что очень важно особенно при стертых и атипичных формах заболевания. Однако метод РИФ не дает возможности четко разграничить периоды заболевания, сказать что-либо о инфекционности вируса, выявить персистирующий вирус.

Выделение вируса из клинического материала методом клеточных культур на чувствительных клетках (МКК) в лабораториях используется в единичных случаях. Ценность метода заключается в том, что, во-первых, выделение вируса свидетельствует о его инфекционной активности, а во-вторых, о продуктивной инфекции. Оно может являться также доказательством генерализации инфекционного процесса.

Каждый из применяемых методов для диагностики ГВИ обладает несомненными достоинствами, но все стороны развития и течения ГВИ у больного можно охватить только комплексным исследованием. Рекомендуемая нами схема исследования клинического материала от больных с подозрением на ГВИ представляется следующими этапами:

• определение специфических антител к ВПГ в сыворотке крови пациента – для выявления инфицированных ВПГ больных и получения косвенных данных о развитии инфекционного процесса;

• выявление антигена ВПГ и вирусной ДНК в клиническом материале – для определения формы инфекции и степени распространения вируса в организме больного;

• выделение вируса герпеса из клинического материала, что позволяет судить об его инфекционной активности и оценить характер течения ГВИ.

По изложенной схеме мы исследовали клинические материалы (сыворотки крови, слюну, мочу, смывы и соскобы из урогенитального тракта) от 93 мужчин с подозрением на генитальную ГВИ.

Методом ИФА специфические антитела к ВПГ в сыворотке крови были выявлены у 72% мужчин. Однако в подавляющем большинстве специфические антитела относились к классу IgG в титре 1:200-1:800, что может свидетельствовать о наличии ГВИ. И только у 4 больных (4,3%) наряду с антителами IgG в сыворотке крови были выявлены антитела IgM в диагностически значимом титре (1:100-1:400), то есть наблюдался рецидив заболевания. У 26 мужчин антитела к ВПГ методом ИФА в сыворотке обнаружены не были.

На втором этапе проводили выявление антигена ВПГ методом иммунофлюоресценции в клетках слюны, мочи и уретры. Антиген ВПГ был выявлен в 35% случаев. Наличие вирусной ДНК было подтверждено методом ПЦР у 67 больных, у 26 пациентов ни антиген, ни вирусная ДНК не диагностировались. Выделить ВПГ из клинического материала (мочи, слюны, соскобов уретры) на клеточной культуре ФЛЭЧ удалось у 11 больных.

Анализ полученных результатов лабораторных исследований заболевания у этой группы пациентов с ГВИ позволил сделать выводы: у 4 мужчин наблюдался рецидив ГВИ, о чем свидетельствуют наличие антител класса М в сыворотке крови, антигена ВПГ в клетках мочи и уретры и выделение вируса из клинического материала (рис. 1); у 7 пациентов заболевание имело хронический характер, поскольку в течение длительного времени – до 36 дней с момента первичного обращения не происходило увеличения титра антител, но при этом выявлялся антиген ВПГ в клинических материалах и выделялся вирус из клеток уретрального канала (рис.2); у 56 мужчин при высоких титрах специфических антител к ВПГ (1:400 – 1:800) антиген не удалось выявить, что при отсутствии каких-либо клинических симптомов ГВИ позволило диагностировать латентную инфекцию (рис.3). 

image002.jpg

.

Назад в раздел

1


Ближайшие мероприятия

×
×